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摘要：本发明提供一种3’mRNA测序文库的构建方法，包括以下步骤：提供目标RNA；构建逆转录体系，对目标RNA进行逆转录，得到mRNA‑cDNA杂合链；降解mRNA‑cDNA杂合链中的RNA，得到3’端带有特定接头序列的单链cDNA；构建双链合成体系，将所述单链cDNA转化为双链DNA；回收双链合成产物并以双链合成产物为模板进行PCR文库扩增，生成用于测序的双链DNA产物。本发明省去了传统全长转录本测序建库的polyT磁珠富集或核糖体RNA清除，mRNA打断，接头连接等步骤，显著简化了文库构建过程，缩短了操作时间，减少了试剂和耗材的使用量。
主权项：1.一种3’mRNA测序文库的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：提供目标RNA；构建逆转录体系，对所述目标RNA进行逆转录，得到mRNA-cDNA杂合链；降解所述mRNA-cDNA杂合链中的RNA，得到3’端带有特定接头序列的单链cDNA；构建双链合成体系，加入KlenowFragmentDNA聚合酶和双链合成随机引物，将所述单链cDNA转化为双链DNA；回收双链合成产物并以所述双链合成产物为模板进行PCR文库扩增，生成用于测序的双链DNA产物。
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百度查询： 澳门科技大学 一种3'mRNA测序文库的构建方法
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