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申请/专利权人：华南理工大学
申请日：2024-03-27
公开（公告）日：2024-07-02
公开（公告）号：CN118272287A
主分类号：C12N5/07
分类号：C12N5/07;C12Q1/02
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.07.19#实质审查的生效;2024.07.02#公开
摘要：本发明涉及抗氧化活性筛选领域，具体涉及一种基于秀丽线虫模型的靶向线粒体抗氧化活性筛选方法。本发明使用具有GFP标记线粒体的秀丽线虫模型为对象，将抗氧化活性聚焦在与细胞内氧化还原密切相关的亚细胞器线粒体，进行靶向线粒体抗氧化活性筛选方法，可以更加准确反映出活性物质对秀丽线虫体内氧化还原水平的影响，该方法具有实验周期短、操作简便、费用低等优点，适用于对活性物质进行规模性筛选，实验结果可视化等优点。
主权项：1.一种基于秀丽线虫模型的靶向线粒体抗氧化活性筛选方法，其特征在于包含如下步骤：1将具有GFP标记线粒体的秀丽线虫虫卵在S.Medium培养液中培养至幼虫L1期；2在步骤1获得的秀丽线虫中加入待筛选样品、浓缩NA22菌液和S.Medium培养液，然后继续培养至幼虫L4期；收集秀丽线虫并清洗；3将5-氟-2′-脱氧尿嘧啶核苷、氨苄青霉素、浓缩NA22菌液、洗净后的秀丽线虫和S.Medium培养液混合，继续培养至成虫期；收集秀丽线虫并清洗；4将洗净后的秀丽线虫置于TMREM9缓冲液中，进行染色处理；收集秀丽线虫并清洗；5将步骤4洗净后的线虫和M9缓冲液混合，进行脱色处理；收集秀丽线虫并清洗；6用盐酸左旋咪唑将步骤5洗净后的秀丽线虫固定于琼脂糖软垫上，采用荧光显微镜进行拍照，分别获得绿色和红色荧光图片；将获得的荧光图片进行处理，分别获得绿色荧光图片的平均荧光强度Mean-GFP和红色荧光图片的平均荧光强度Mean-TMRE；7以Mean-TMREMean-GFP评价每条线虫体内线粒体健康水平以及待筛选样品是否具有靶向线粒体抗氧化活性。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华南理工大学 一种基于秀丽线虫模型的靶向线粒体抗氧化活性筛选方法
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