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一种莱茵衣藻线粒体提取试剂及其提取纯化方法 

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申请/专利权人:深圳大学

摘要:本发明公开了一种莱茵衣藻线粒体提取试剂及其提取纯化方法。其中,一种莱茵衣藻线粒体提取试剂,包括:甘露醇0.6M,Tris‑HCl10mM,EDTA5mM,BSA0.2%WV,聚乙烯吡咯烷酮0.3%WV,pH=7.8。该莱茵衣藻线粒体的提取纯化方法,包括将莱茵衣藻加入到上述的一种莱茵衣藻线粒体提取试剂中;进行超声处理获得破碎细胞液;采用差速离心法对破碎细胞液进行处理后所得沉淀即为线粒体粗提物;对线粒体粗提物进行纯化分离即可获得线粒体精提物。本发明克服现有技术中的提取试剂盒并不适用于衣藻细胞中的线粒体提取,导致提取质量偏低、提取得到的线粒体活性较低的缺陷;本发明提取得到的莱茵衣藻线粒体具有质量、活性和纯度高的优点。

主权项:1.一种莱茵衣藻线粒体提取纯化方法,其特征在于,包括:获取莱茵衣藻;将莱茵衣藻与破碎缓冲液混合,所述破碎缓冲液的组成为:0.6M甘露醇,10mMTris-HCl,5mMEDTA,0.2%BSA,0.4%聚乙烯吡咯烷酮;每克莱茵衣藻中添加的破碎缓冲液的含量为5~8mL;所述聚乙烯吡咯烷酮为PVP40;所述的破碎缓冲液的pH值调节为7.8;进行超声处理获得破碎细胞液,超声条件为:200~240W,工作5s,暂停5s的程序超声破碎10~20min;所述破碎细胞液的pH值处于7.0~7.2之间;采用差速离心法对破碎细胞液进行处理后所得沉淀即为线粒体粗提物;对线粒体粗提物进行纯化分离即可获得线粒体精提物。

全文数据:

权利要求:

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