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申请/专利权人：国科大杭州高等研究院
摘要：本发明涉及交联肽段定量检测技术领域，公开了一种交联肽段的低能碎裂靶向定量方法，步骤为：用二琥珀酰亚胺亚砜作为交联剂，与非变性蛋白质复合物进行交联，得到交联产物；在交联产物中加入尿素和二硫苏糖醇进行反应，然后再加入碘乙酰胺进行黑暗反应后加入碳酸氢铵；加入胰蛋白酶酶切，获得交联肽段；将交联肽段脱盐并冻干，复溶后进行液质联用检测；对质谱检测结果进行定量。本发明使用质谱可碎裂交联剂二琥珀酰亚胺亚砜制备交联肽段，通过控制碎裂能量使交联剂发生碎裂而交联肽段不碎裂，利用这个特点，在较低能量下，可以产生较高信号的峰，更适合低丰度的交联肽段。
主权项：1.一种交联肽段的低能碎裂靶向定量方法，其特征是，包括如下步骤：（1）用二琥珀酰亚胺亚砜作为交联剂，与非变性蛋白质复合物进行交联，得到交联产物；（2）在交联产物中加入尿素和二硫苏糖醇进行反应，然后再加入碘乙酰胺进行黑暗反应后加入碳酸氢铵；（3）向步骤（2）的反应产物中加入胰蛋白酶酶切，获得交联肽段；（4）将交联肽段脱盐并冻干，复溶后进行液质联用检测；质谱碎裂模式为HCD，碎裂能量为15%~20%；（5）对质谱检测结果进行定量，定量时交联肽段产生2~4个离子峰，选择信号最高的特征诊断峰，作为交联肽段的最终定量信号。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 国科大杭州高等研究院 一种交联肽段的低能碎裂靶向定量方法
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