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寡糖的制备 

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摘要:本发明涉及一种用于制备重组寡糖、优选3~8个单糖单元的重组寡糖、更优选3~5个单糖单元的重组寡糖、特别是HMO的转基因微生物,其包含一种或多种编码蔗糖利用系统的基因,因此微生物可以使用蔗糖作为碳源和能量来源。一种或多种编码蔗糖利用系统的基因优选为一种或多种编码异源PTS依赖性蔗糖利用转运系统的基因,如scr基因。

主权项:1.一种通过使碳水化合物受体糖基化来制备重组寡糖的方法,所述受体为乳糖,其中所述重组寡糖为2’-FL,所述方法包括以下步骤:a提供大肠杆菌细胞,其能够使所述受体内化至所述细胞,并且其包含:-编码糖基转移酶的重组基因,所述糖基转移酶能够使活化的糖核苷酸的糖残基转移至在所述细胞中内化的受体,和-在所述细胞中制造所述活化的糖核苷酸的生物合成路径,b在所述受体和蔗糖的存在下培养所述细胞,以及c从所述细胞、培养基或二者中分离所述寡糖,所述方法特征在于,所述细胞还包含一种或多种编码异源PTS-依赖性蔗糖利用转运系统的基因,由此所述细胞能够使用蔗糖作为碳源,用于制造所述活化的糖核苷酸,以及作为能量来源,用于制造所述寡糖,并且其中所述活化的糖核苷酸为GDP-Fuc,其中所述糖基转移酶为α-1,2-岩藻糖基转移酶,其能够将GDP-Fuc的岩藻糖残基转移至内化的乳糖,形成2’-FL,并且其中所述异源PTS-依赖性蔗糖利用转运系统包括scr基因,所述scr基因包括蔗糖膜孔蛋白的scrY、PTS透性酶的scrA、蔗糖-6-磷酸水解酶的scrB、阻遏蛋白的scrR、以及任选的果糖激酶的scrK。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 格礼卡姆股份公司 寡糖的制备

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