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摘要：本发明属于基因工程领域，具体涉及一种木葡糖酸醋杆菌木糖利用代谢的构建方法。本发明将木糖Weimberg代谢途径相关基因构建于一个重组质粒表达载体上，将重组质粒整合到宿主菌木葡糖酸醋杆菌中获得重组木葡糖酸醋杆菌工程菌株CGMCC26045其于2022年11月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.26045的构建方法。并通过发酵初步确定其利用木糖产细菌纤维素bacterialcellulose,BC的能力高于木葡糖酸醋杆菌原始菌。通过发酵参数测定，工程菌比野生菌BC膜产量提高了100％以上，木糖利用率提高了40％以上。
主权项：1.一种木葡糖酸醋杆菌中Weimberg木糖代谢途径的构建方法，其特征在于：将木糖Weimberg代谢途径相关基因构建于一个重组质粒表达载体上，将重组质粒整合到宿主菌木葡糖酸醋杆菌中，获得重组木葡糖酸醋杆菌；所述宿主菌木葡糖酸醋杆菌和重组木葡糖酸醋杆菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号分别为CGMCCNo.2955和CGMCCNo.26045；所述重组质粒的构建方法为：将来自新月丙杆菌的木糖Weimberg代谢途径相关基因xylA、xylD、xylX，经过密码子优化，按照如下顺序：xylA-xylD-xylX逐个连接到质粒pBla上，通过pBla上bla启动子和rrnBT1终止子表达xylA、xylD、xylX，得到重组质粒pBla-xylA-xylD-xylX，其中pBla的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，bla启动子和rrnBT1终止子的核苷酸序列分别如SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示，经过密码子优化的xylA、xylD、xylX的核苷酸序列分别如SEQIDNO.4、SEQIDNO.5、SEQIDNO.6所示，pBla-xylA-xylD-xylX的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示。
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百度查询： 天津科技大学 木葡糖酸醋杆菌中Weimberg木糖代谢途径的构建方法
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