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摘要：本发明公开了一种用于基因分型的鸡毛囊DNA提取的方法，包括步骤：毛囊采集：采集鸡的翼羽，将羽根中的髓质挤出，挑入离心管；DNA抽提：向离心管加入NaOH溶液并研磨，再次加入NaOH溶液和蛋白酶K，将离心管水浴后离心处理，取出上清液；DNA沉淀：向上清液中加入冰异丙醇，低温静置后离心处理，倒掉离心管中液体，将离心管倒扣在吸水纸上，向离心管中加入乙醇，上下颠倒混匀，将离心管放入离心机离心，倒掉上清液，并将离心管倒扣在吸水纸上；DNA溶解：向离心管中加入TE溶液，缓慢吹打混匀，直至DNA溶解于TE溶液中。本发明可以从鸡毛囊中高效提取完整基因组DNA，且获得的DNA纯度和浓度较好，可以用于基因分型等试验。
主权项：1.一种用于基因分型的鸡毛囊DNA提取的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、毛囊采集：采集鸡的翼羽或尾羽，对羽根消毒后，将羽根中的髓质挤出，挑入2ml的离心管中；S2、DNA抽提：向离心管中加入30μLNaOH溶液，用塑料研磨杵进行手动研磨；再加入770μLNaOH溶液，离心管上下颠倒混匀10次，加入20μL蛋白酶K；将离心管放入60℃水浴锅中水浴1h，期间每隔15min取出上下颠倒混匀10次；水浴完成后，取出离心管，并加入80μL1molL的Tris-HCL，上下颠倒混匀10次；再次将离心管放入离心机，将离心完毕的离心管取出，吸取上清液750μL至新离心管中；S3、DNA沉淀：向装有上清液的离心管中加入960μL冰异丙醇，上下颠倒混匀10次，放入4℃冰箱静置10min；将离心管放入离心机离心，有白色DNA沉淀附着于离心管管底；倒掉离心管中液体，并将离心管倒扣在吸水纸上5min；向离心管中加入800μL的80%乙醇，用手将白色DNA沉淀弹起后，上下颠倒混匀10次；再次将离心管放入离心机离心，白色DNA沉淀又附着于离心管管底；倒掉上清液，并将离心管倒扣在吸水纸上30min；S4、DNA溶解：向离心管中加入100μL的TE溶液，用移液器进行缓慢吹打混匀，直至DNA溶解于TE溶液中。
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百度查询： 铜仁学院 一种用于基因分型的鸡毛囊DNA提取的方法
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