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以红托竹荪子实体为原料的DNA提取方法 

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摘要:本发明公开了一种以红托竹荪子实体为原料的DNA提取方法,涉及红托竹荪分子生物学技术领域,包括以下步骤:1)取红托竹荪子实体组织与含溶壁酶、纤维素酶的混合酶溶液,得到第一溶液;2)在第一溶液中加入3molL浓度的醋酸钾溶液涡旋混匀,冰浴20~25min后,得到最终上清液;3)在最终上清液中加入最终上清液二倍体积异丙醇混匀,洗涤、离心再弃上清后,烘干得到干燥DNA。采用该方法所得DNA片段琼脂糖凝胶电泳检测中可得清晰完整的条带,说明所提取DNA满足后续各项检测所需质量要求。

主权项:1.一种以红托竹荪子实体为原料的DNA提取方法,其特征在于,包括以下步骤:1)取红托竹荪子实体组织与含溶壁酶、纤维素酶的混合酶溶液,混合、研磨、冰面上消化后,加入去多糖buffer冰浴后离心,加入65℃下预热的4×CTAB裂解液、20mgml蛋白酶K溶液混匀后65℃水浴10~15h,得到第一溶液;2)在第一溶液中加入3molL浓度的醋酸钾溶液涡旋混匀,冰浴20~30min后,恢复至室温后加入由酚、氯仿、异戊醇组成的混合溶剂,室温摇匀10~15h后,离心10~15min取上清液加入与上清液等体积的由氯仿、异戊醇组成混合溶液,室温摇匀10~15h后,离心10~15min取上清液,得到最终上清液;3)在最终上清液中加入最终上清液二倍体积异丙醇混匀,置于-20~-18℃环境下20~30min后离心10~15min弃上清后,洗涤、离心再弃上清后,烘干得到干燥DNA。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所 云南省食用菌产业发展研究院(云南省供销合作社科学研究所) 以红托竹荪子实体为原料的DNA提取方法

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