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新的前间区序列邻近基序序列以及利用其修饰细胞基因组中靶核酸的方法 

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摘要:提供一种利用新的PAM序列修饰细胞基因组中靶核酸的方法以及基因组的靶核酸由此被修饰的细胞。据此,可以通过靶向原先无法作为基因组编辑的靶位点来执行基因组编辑,由此能够扩大基因组编辑的应用范围。

主权项:1.一种修饰细胞基因组中靶核酸的方法,其包括,孵育包括靶核酸的细胞,编码Casclusteredregularlyinterspacedpalindromicrepeats-associated:CRISPRassociated核酸酶或其变体的多核苷酸,以及向导RNA,其中,所述靶核酸包括前间区序列邻近基序protospaceradjacentmotif:PAM以及与所述向导RNA互补的靶序列,所述PAM由核苷酸序列所组成,所述核苷酸序列选自由5'-NAGN-3'、5'-ACGG-3'、5'-GTGC-3'、5'-RAGN-3'、5'-CAGH-3'、5'-TAGB-3'、5'-AAGH-3'、5'-CAGY-3'、5'-GAGN-3'、5'-VAAG-3'、5'-NYGG-3'、5'-MTGC-3'、5'-GTGH-3'、5'-RCAG-3'、5'-VTAG-3'、5'-SACG-3'、5'-NARG-3'、5'-WAGA-3'、5'-GAGT-3'、5'-NACG-3'、5'-GAGG-3'、5'-VYAG-3'、5'-GAAT-3'、5'-VACG-3'、5'-AYGA-3'、5'-GAGH-3'、5'-GATG-3'以及5'-NAAG-3'所组成的组中,所述靶核酸可以被所述Cas核酸酶或其变体、所述向导RNA的复合物所识别,并且,所述Cas核酸酶或其变体、向导RNA的复合物序列特异性修饰靶核酸。

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