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摘要:本发明一般地涉及负责磷酸化调节的酶的测定,所述酶包括激酶例如介导蛋白质和肽磷酸化的蛋白激酶和磷酸酶例如介导蛋白质和肽去磷酸化的蛋白磷酸酶。本发明的某些方面使用表现出螯合增强发光的镧系元素离子,例如铕离子。通过激酶对肽进行磷酸化可引起镧系元素离子、磷酸根基团和报道基团例如羟基喹啉之间形成络合物,其在络合状态下时导致发光。因此,在某些实施方案中,对发光的测定可指示激酶活性。某些实施方案还包括使用底物以检测磷酸酶活性,其中去磷酸化导致信号测定的损失。另一些方面一般地涉及用于制备和使用这样的肽或络合物的技术、包含这样的肽或络合物的套件等。
主权项:1.组合物,其包含:肽,其具有包含以下结构的第一部分: 其中R1、R2、R3、R4和R5中的每一个独立地为氢或-SO2X,以使得R1、R2、R3、R4和R5中的至少一个为-SO2X,其中X为-OR’或-NR’R”,R’和R”各自独立地为氢或烷基,并且n为正整数,以及包含磷酸根基团的第二部分,其中所述第一部分的喹啉环的N和与作为所述喹啉环的环成员的碳原子相结合的O以及所述第二部分的磷酸根基团通过镧系元素离子配位,其中所述镧系元素离子是处于3+状态的铕离子;其中所述磷酸根基团是所述肽内磷酸化的氨基酸残基的一部分;并且其中所述结构的-CH2n-与所述肽内的第二氨基酸残基共价结合,其中所述磷酸化的氨基酸残基与所述第二氨基酸残基被至少一个氨基酸残基隔开。
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百度查询: 麻省理工学院 国家科学研究中心 国立蒙彼利埃高等化学学院 蒙彼利埃大学 通过羟基喹啉敏化的螯合物对激酶和/或磷酸酶的感测
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