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经优化的碱基编辑器 

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摘要:本发明涉及一种腺嘌呤碱基编辑器ABE及其组分。本发明还涉及一种复合物,该复合物包含处于功能缔合形式的腺嘌呤碱基编辑器ABE和指导RNA。本发明进一步涉及一种编码该ABE指导RNA的核酸分子,一种包含编码该腺嘌呤碱基编辑器的核酸序列和或编码该指导RNA的核酸序列的表达构建体或载体。本发明进一步涉及一种包含腺嘌呤碱基编辑器ABE的细胞和一种对在包括细菌和古生菌生物的原核生物或真核生物的至少一种细胞中的目的基因组中的靶位点进行腺嘌呤碱基编辑的方法。除此之外,本发明涉及与所提供的ABE相关的各种方法、试剂盒和用途。

主权项:1.一种腺嘌呤碱基编辑器ABE,该腺嘌呤碱基编辑器按序列顺序包含以下结构元件:a.至少一个N末端NLS序列;b.TadA9腺苷脱氨酶结构域或其功能变体;c.至少一个接头结构域,优选地其中该至少一个接头包含根据SEQIDNO:51的六-GGGGS接头或由其组成;d.dCas12a或其功能片段,或nCas12a或其功能片段,其中该dCas12a或该nCas12a或其功能片段包含至少一个或多个突变,其中该至少一个或多个突变赋予增加的活性和或增强的温度耐受性,其中该至少一个或多个突变中的一个分别对应于dCas12a直向同源物或同源物中在与SEQIDNO:14、15或16的D156,SEQIDNO:17、18或19的E174和SEQIDNO:20至28的E184同源的位置处的突变,该至少一个突变赋予增加的活性和或增强的温度耐受性,特别地其中该dCas12a直向同源物或同源物中的该至少一个突变分别对应于作为参考的SEQIDNO:14至43的同源位置处的D到R、E到R、或K到DE突变;e.至少一个C末端NLS序列;其中该至少一个N末端NLS序列和该至少一个C末端NLS序列能够是相同的或不同的。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 巴斯夫农业种子解决方案美国有限责任公司 非营利性组织佛兰芒综合大学生物技术研究所 国立比利时根特大学 经优化的碱基编辑器

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