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摘要：本发明涉及生物技术领域，尤其涉及宽范围多功能的碱基编辑器、其构建方法及应用。本发明通过对胞嘧啶碱基编辑器中的胞嘧啶脱氨酶、FrCas9n重要元件进行优化，获得了可用于微生物的基于FrCas9n的胞嘧啶碱基编辑器，所述碱基编辑器与现有碱基编辑器相比，PAM位点灵活多样，前置碱基无偏好性，编辑窗口更宽，脱靶率更低，特异性更强，可用于多种革兰氏阴性菌的基因组编辑中，实现了宽范围突变文库的高效构建与功能基因的快速敲除，为微生物基因编辑工具箱补充了强有力的工具。
主权项：1.高保真FrCas9n，其特征在于，包括如SEQIDNO:103所示的氨基酸序列，且具有如下所示突变中的至少一种：第61位精氨酸突变为丙氨酸；和或第532位天冬酰胺突变为丙氨酸；和或第694位天冬酰胺突变为丙氨酸；和或第724位赖氨酸突变为丙氨酸；和或第728位谷氨酰胺突变为丙氨酸；和或第892位天冬酰胺突变为丙氨酸；和或第964位谷氨酰胺突变为丙氨酸。
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百度查询： 中国科学技术大学 宽范围多功能的碱基编辑器、其构建方法及应用
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