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摘要:本发明涉及一种高活性、高热稳定性的肝素N‑硫酸基转移酶突变体及其编码基因与应用。所述N‑硫酸基转移酶突变体M8的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示,编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。所述N‑硫酸基转移酶突变体M8是野生型N‑硫酸基转移酶中24个氨基酸发生突变。经过稳定性测定,相比野生型N‑硫酸基转移酶在37℃下仅只保温不足1天就丧失全部活性,本发明N‑硫酸基转移酶突变体M8具有高活性和极强的高热稳定性,可以在37℃下保温7天依然保持50%左右的活性。本发明提高了肝素的化学酶法合成效率,拓展了N‑硫酸基转移酶突变体的应用范围,使得在高温下合成肝素成为可能,极大地促进了肝素仿生合成应用化发展。
主权项:1.一种N-硫酸基转移酶突变体M8,其特征在于,其氨基酸序列如SEQIDNO.2所示所述N-硫酸基转移酶突变体M8是野生型N-硫酸基转移酶中24个氨基酸发生突变;所述突变具体为:G625S、S637P、E660D、R688K、V699I、D721N、S738D、S742K、K743E、I761L、N771S、K779Q、E784D、T801I、T807H、L842E、D843E、S741P、A767Y、E839P、A846K、T869P、Y864H、T872L。
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