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申请/专利权人:西部(重庆)科学城种质创制大科学中心
摘要:本发明公开了一种利用CsMEKK1‑2基因提高柑橘耐黄龙病的方法,包括采用RNAi干扰载体下调CsMEKK1‑2基因在柑橘细胞中的表达水平或者利用CRISPRCas9技术定点突变CsMEKK1‑2基因,使由CsMEKK1‑2基因编码的蛋白功能丧失,具体步骤为:克隆柑橘CsMEKK1‑2基因序列;构建RNAi干扰载体和CRISPRCas9突变载体;植物表达载体转化柑橘,得到转基因植株。本发明通过克隆柑橘CsMEKK1‑2基因编码序列,构建RNAi干扰载体或者CRISPRCas9突变载体,然后转化柑橘,得到的转基因植株毛状根黄龙病的发病程度显著减轻,能够显著提高柑橘对黄龙病的抗性,并且不影响转基因植株的表型,在柑橘抗黄龙病育种中具有重大的应用价值,可以作为候选基因同多个黄龙病抗、感病基因进行黄龙病抗性育种。
主权项:1.一种利用CsMEKK1-2基因提高柑橘耐黄龙病的方法,其特征在于,通过下调柑橘属植物中CsMEKK1-2基因的表达水平或者突变CsMEKK1-2基因,提高柑橘属植物对黄龙病的抗性,所述CsMEKK1-2基因的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示;下调柑橘属植物中CsMEKK1-2基因的表达水平的方式采用RNAi干扰技术下调CsMEKK1-2基因在柑橘细胞中的表达;突变CsMEKK1-2基因的具体方法为:利用CRISPRCas9技术定点突变CsMEKK1-2基因,使由CsMEKK1-2基因编码的蛋白功能丧失。
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权利要求:
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