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摘要：发明公开了高产L‑鸟氨酸大肠杆菌Nissle1917的构建及其益生功能，属于生物技术领域。本发明利用CrisperCas9技术对代谢路径进行修饰，构建L‑鸟氨酸生产菌株，利用筛选获得的内源性启动子对代谢路径关键基因过表达，引入谷氨酸棒杆菌来源的基因增强代谢通量，同时通过修饰葡萄糖吸收路径、L‑鸟氨酸转运蛋白，进一步增强L‑鸟氨酸积累获得最终改造菌株CEcN。最终5L上罐发酵L‑鸟氨酸产量为14.2g·L‑1。选用雄性小鼠C57BL6J随机分组比较灌胃L‑鸟氨酸改造菌株对正常小鼠的生长影响及其在急性酒精条件下对肝肠的保护作用，改造菌株表现出明显的肝肠保护作用。
主权项：1.一种基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌以大肠杆菌Nissle1917为出发菌株，敲除了出发菌株基因组上的以下基因：鸟氨酸氨甲酰转移酶编码基因argF-1和argF-2、阻遏蛋白编码基因argR、L-精氨酸脱羧酶基因adiA、L-精氨酸脱羧酶基因speA、L-鸟氨酸脱羧酶基因speF、L-鸟氨酸脱羧酶基因speC、精氨酸N-琥珀酰转移酶基因astA、L-谷氨酸脱羧酶基因gadA、L-谷氨酸脱羧酶基因gadB、谷氨酰胺合成酶编码基因glnA和氨基转移酶编码基因ilvE；以C1启动子启动N-乙酰谷氨酸合成酶编码基因argA的表达；所述C1启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；过表达了双功能鸟氨酸乙酰基转移酶ArgJ、乙酰基转移酶cg3035、葡萄糖转运吸收蛋白Ptsg、L-鸟氨酸转运蛋白LysE和缬氨酸转运蛋白LysO。
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百度查询： 江南大学 高产L-鸟氨酸大肠杆菌Nissle 1917的构建及其益生功能
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