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表达HER2单链抗体的重组大肠杆菌Nissle 1917及其功能验证方法 

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摘要:本发明提供了一种表达HER2单链抗体的重组大肠杆菌Nissle1917及其功能验证方法。该技术方案首先将HER2单链抗体的编码基因通过酶切酶连的方法与pet28c载体连接,再利用所得的重组质粒转化至大肠杆菌Nissle1917中,从而得到重组大肠杆菌Nissle1917。本发明中采用对HER2阳性细胞的定点靶向特性和大肠杆菌Nissle1917在肿瘤内聚集的特性,位点特异性地实现HER2抗体蛋白的表达,从而更准确地杀伤HER2阳性肿瘤细胞,降低对机体正常细胞的损伤。在此基础上,本发明提供了考察该重组菌抗肿瘤功效的一种实验方法,将活化后的菌株采用灌胃或尾静脉注射的方式处理乳腺癌动物模型,再考察其肿瘤体积的变化。

主权项:1.表达HER2单链抗体的重组大肠杆菌Nissle1917,其特征在于该重组大肠杆菌Nissle1917是由以下方法构建的:1将HER2抗体的编码基因片段通过酶切酶连的方法连接到pet28c质粒中,得到pet28c-HER2重组质粒;2将所述pet28c-HER2重组质粒转化至大肠杆菌Nissle1917中,得到重组大肠杆菌Nissle1917-pet28c-HER2,即为所述表达HER2单链抗体的重组大肠杆菌Nissle1917;步骤1中HER2抗体的编码基因片段是核苷酸序列如SEQIDNo.1所示的DNA片段。

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权利要求:

百度查询: 南昌大学 表达HER2单链抗体的重组大肠杆菌Nissle 1917及其功能验证方法

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