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申请/专利权人：瑞泽恩制药公司

摘要：本发明涉及用于评估样品中多聚体蛋白质的量和或纯度的色谱系统和方法，其中所述色谱系统包括经由开关阀连接的两种不同的亲和色谱层析基质。

主权项：1.一种用于定量样品中异二聚体抗体的量和纯度的方法，所述样品包含异二聚体抗体、第一同二聚体抗体杂质和第二同二聚体抗体杂质的混合物，其中所述异二聚体抗体和所述第一同二聚体抗体杂质与第一亲和基质结合，所述第二同二聚体抗体杂质与第二亲和基质结合但其与第一亲和基质的结合被取消，并且与第一同二聚体抗体杂质相比，所述异二聚体抗体具有较低的对第一亲和基质的亲和力，所述方法包括下述步骤：a.在其中所述异二聚体抗体和所述第一同二聚体抗体杂质结合至第一亲和基质的条件下，将样品施加到色谱系统中的第一亲和基质，其中所述色谱系统包括第一亲和基质、第二亲和基质、开关阀和检测器，并且其中第一亲和基质经由开关阀串行连接至第二亲和基质；b.使用第一流动相洗涤第一亲和基质，所述第一流动相包含具有约pH5.6至约pH7.4的离液剂，所述开关阀处在使得流过物直接施加到第二亲和基质的位置，其中所述流过物中的第二同二聚体抗体杂质结合至第二亲和基质，并且所述异二聚体抗体和第一同二聚体抗体杂质保留在第一亲和基质上；c.切换开关阀以使第一亲和基质与第二亲和基质断开并使第一亲和基质与检测器直接连接，然后使用第二流动相从第一亲和基质洗脱所述异二聚体抗体，所述第二流动相包含具有约pH4.3至约pH5.0的离液剂，而第一同二聚体抗体杂质保留在第一亲和基质上，并测定洗脱的异二聚体抗体的量；d.使用第三流动相从第一亲和基质洗脱所保留的第一同二聚体抗体杂质通过检测器，并测定洗脱的第一同二聚体抗体杂质的量，所述第三流动相包含具有约pH2.0至约pH2.8的离液剂；e.将开关阀切换回到将第一亲和基质串行连接至第二亲和基质和将第二亲和基质串行连接至检测器，然后使用第三流动相从第二亲和基质洗脱第二同二聚体抗体杂质通过检测器，并且测定洗脱的第二同二聚体抗体杂质的量，以及f.如在步骤c中定量样品中异二聚体抗体的量，并定量样品中异二聚体抗体的纯度，其中异二聚体抗体的纯度通过异二聚体抗体的量与第一同二聚体抗体杂质、异二聚体抗体和第二同二聚体抗体杂质的量的总和的比率来确定。

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百度查询： 瑞泽恩制药公司 用于测定多聚体蛋白质的量和纯度的方法和色谱系统