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申请/专利权人：北京林业大学
申请日：2024-06-05
公开（公告）日：2024-07-05
公开（公告）号：CN118291529A
主分类号：C12N15/82
分类号：C12N15/82;C12N15/65;A01H7/00
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.07.23#实质审查的生效;2024.07.05#公开
摘要：本发明提供了一种发根根瘤菌介导的油松不定根遗传转化方法，将带有RUBY报告基因的载体转化到发根根瘤菌中；当油松种子苗的茎长距根部超过3cm时，切掉根部，将伤口处浸没在发根根瘤菌重悬液中，并进行抽真空；将植株根部伤口处裹满发根根瘤菌菌体后，移栽至土培基质中培养30~45d，当愈伤组织分化为再生不定根时，观察再生不定根的颜色，判断是否为植物阳性转化不定根。本发明所述构建的体系突破了油松遗传转化困难的技术屏障，为油松重要基因的功能以及根茎之间信号转导等相关研究工作提供了技术操作手段，并且为后续油松乃至其他针叶树种的关键功能基因功能鉴定以及遗传修饰种质创制提供了技术支撑和指导。
主权项：1.一种发根根瘤菌介导的油松不定根遗传转化方法，包括如下步骤：（1）将含有RUBY报告基因和目标基因的载体转化到发根根瘤菌中，得到含有RUBY报告基因和目标基因的发根根瘤菌菌体；（2）将油松种子种在湿润且蓬松的水苔上，培养得到幼苗；（3）当植物外植体的茎长距根部超过3cm时，切掉所述植物根部，将植物伤口处浸没在发根根瘤菌重悬液中，然后对其进行抽真空，然后将所述植物外植体从重悬液中取出，将其根部伤口处裹满含有RUBY报告基因和目标基因的发根根瘤菌菌体，然后移栽至土培基质中；（4）培养30~45d后，当愈伤组织分化为再生不定根时，观察再生不定根的颜色，判断是否为植物阳性转化根；阳性转化根为粉红色。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 北京林业大学 一种发根根瘤菌介导的油松不定根遗传转化方法
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