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申请/专利权人：上海茵创昕生物科技有限公司
申请日：2024-02-20
公开（公告）日：2024-07-05
公开（公告）号：CN118302538A
主分类号：C12Q1/6806
分类号：C12Q1/6806
优先权：["20230427 CN PCT/CN2023/091367"]
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.07.23#实质审查的生效;2024.07.05#公开
摘要：一种用于检测剪接异构体的靶向高通量测序方法，包括用于高通量测序的测序文库的建立方法，包括以下步骤：1采用逆转录引物对样本RNA进行逆转录，加入普通dNTP和3’修饰的dNTP，反应得到cDNA第一链；2通过点击化学反应将5’端带有炔基修饰的寡核苷酸片段与步骤1获得的cDNA片段连接；3以步骤2的反应产物为模板，PCR扩增；4获得测序文库。靶向富集引物可在逆转录或PCR扩增步骤中引入。富集步骤反应体系中含有多个基因特异性引物，且每个引物基于该转录本中选择性剪接事件的下游外显子区段设计，保证逆转录产生的随机长度片段覆盖剪接位点。
主权项：1.一种用于高通量测序的测序文库的建立方法，其包括以下步骤：1采用逆转录引物对样本RNA进行逆转录，加入普通dNTP和3’修饰的dNTP，反应得到cDNA第一链，所述3’修饰的dNTP选自以下的一种或多种：AzNTP、AmNTP、propargyl-NTP、HalNTP；2通过点击化学反应将5’端带有炔基修饰的寡核苷酸片段与步骤1获得的cDNA片段连接，所述寡核苷酸片段包含随机序列和通用测序引物1seq1的互补区段序列；3以步骤2的反应产物为模板，进行PCR反应扩增；4获得测序文库。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海茵创昕生物科技有限公司 一种用于检测剪接异构体的靶向高通量测序方法
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