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申请/专利权人：中国科学院动物研究所
摘要：本发明公开了一种用于PacBio测序的文库构建方法。本发明提供了一种PacBio测序文库构建方法，为将含有发卡结构的测序接头通过转座酶插入目标DNA分子，实现DNA环化，得到PacBio测序文库。本发明的实验证明，本发明的PacBio测序文库构建方法，通过有效选择反应缓冲液，使整个反应在从转座插入片段化到文库环化完成均在同一反应管中完成，尤其在低DNA用量的测序文库构建过程中有效地避免了常规片段化步骤后的纯化回收导致的DNA样品损失，提高了模板的利用率，减少了实验的复杂性和时间消耗，可以实现最快在2小时内完成PacBio测序文库的构建与回收。
主权项：1.一种PacBio测序文库构建方法，包括如下步骤：1制备含有发卡结构测序接头的转座酶复合物；所述含有发卡结构测序接头的转座酶复合物由含有发卡结构测序接头与转座酶组装得到；所述含有发卡结构测序接头为将发卡结构测序接头序列退火形成；所述发卡结构测序接头序列从5'端起依次由片段a、片段b和片段c组成；所述片段a和所述片段c反向互补；所述片段a包括转座酶识别序列；所述片段b包括PacBio测序文库的测序接头序列，且所述片段b不与所述片段a相同或互补；2将所述含有发卡结构测序接头的转座酶复合物通过转座反应插入目标DNA分子中，得到转座反应产物；3将所述转座反应产物依次进行环化连接和DNA损伤修复，得到环化的DNA测序文库；即为PacBio测序文库。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国科学院动物研究所 一种用于PacBio测序的文库构建方法
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