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摘要：本发明提供了乳铁蛋白肽高表达菌株及其构建方法和制备重组人乳铁蛋白肽的应用，属于基因工程和生物技术领域；本发明先通过空间结构模拟和AverageRMSF计算选择4段人乳铁蛋白肽，然后构建含3个拷贝数的载体并将3个拷贝数的载体转化进高表达菌株中，得到高表达、高拷贝工程菌株；本发明还通过特殊设计将PDI、Aft1和Sec9表达框整合到一个载体上，转化至高表达、高拷贝工程菌株得到乳铁蛋白肽高表达菌株，所述乳铁蛋白肽高表达菌株让工程菌株产能得到最大释放；所述乳铁蛋白肽高表达菌株能够高产重组人乳铁蛋白肽的同时降低生产升成本，具有很好的实用价值。
主权项：1.乳铁蛋白肽高表达菌株的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：（1）高表达重组工程菌的构建：设计并选取目的重组人乳铁蛋白肽的氨基酸序列，构建含有重组人乳铁蛋白肽核酸序列的重组表达载体；将重组表达载体线性化后转入宿主菌中，得到高表达重组工程菌；所述目的重组人乳铁蛋白肽包括SEQIDNo：1~4任一项所示的氨基酸序列；（2）高拷贝、高表达重组工程菌的构建：扩增步骤（1）所述重组表达载体中含启动子、α信号肽、CDS、终止子的片段，构建含有n个所述片段的多拷贝重组表达载体，将多拷贝重组表达载体转入步骤（1）得到的高表达的重组工程菌中，得到高拷贝、高表达重组工程菌；（3）乳铁蛋白肽高表达菌株的构建：构建辅助因子共表达载体；所述共表达因子包括PDI、Aft1和Sec9，所述共表达载体中的共表达因子的连接顺序依次为PDI、Aft1和Sec9；将辅助因子共表达载体线性化后转入步骤（2）得到的高拷贝、高表达重组工程菌中，得到共表达辅助因子的高拷贝菌株，即得到所述乳铁蛋白肽高表达菌株。
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百度查询： 江苏创健医疗科技股份有限公司 乳铁蛋白肽高表达菌株及其构建方法和制备重组人乳铁蛋白肽的应用
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