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摘要:本发明提供了一种多聚ADP核糖聚合酶1抑制剂的筛选方法、ELISA试剂盒及其应用,涉及生物技术领域。本发明提供的筛选方法,包括:在酶标板上包被组蛋白H3,然后添加多聚ADP核糖聚合酶1和待测药物进行第一次孵育,之后添加NAD+进行第二次孵育;第二次孵育结束后去除反应液,添加特异性识别多聚ADP核糖基化修饰的一抗进行第三次孵育;第三次孵育结束后去除反应液,添加特异性识别所述一抗且带有辣根过氧化物酶标记的二抗进行第四次孵育;第四次孵育结束后去除反应液,添加TMB显色液进行显色反应,根据显色结果计算待测药物对于多聚ADP核糖聚合酶1的抑制率。该筛选方法易实施、高效、通量高。
主权项:1.一种多聚ADP核糖聚合酶1抑制剂的筛选方法,其特征在于,采用ELISA的方法进行筛选,包括以下步骤:在酶标板上包被组蛋白H3,然后添加多聚ADP核糖聚合酶1和待测药物进行第一次孵育,之后添加NAD+进行第二次孵育;第二次孵育结束后去除反应液,添加特异性识别多聚ADP核糖基化修饰的一抗进行第三次孵育;第三次孵育结束后去除反应液,添加特异性识别所述一抗且带有辣根过氧化物酶标记的二抗进行第四次孵育;第四次孵育结束后去除反应液,添加TMB显色液进行显色反应,根据显色结果计算待测药物对于多聚ADP核糖聚合酶1的抑制率。
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百度查询: 杭州圣域生物医药科技有限公司 多聚ADP核糖聚合酶1抑制剂的筛选方法、ELISA试剂盒及其应用
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