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摘要:本发明涉及肝素钠酶解技术领域,具体涉及一种肝素钠酶解精制方法,包括如下步骤:S1.1、称取以下重量份的原料:改性蛋白酶0.5‑1重量份、粗品肝素钠45‑50重量份、乙二胺四乙酸0.1‑0.3重量份、抗坏血酸0.05‑0.1重量份、氯化钠1‑5重量份、过氧化氢3‑5重量份、无水乙醇120‑180重量份;其中,改性蛋白酶由胰蛋白酶和聚丙烯酰胺凝胶按质量比1:1~3通过物理吸附制备而成;S1.2、溶解粗品肝素钠;S1.3、酶解粗品肝素钠;S1.4、氧化粗品肝素钠,S1.5、沉淀得到精制肝素钠,采用改性胰蛋白酶,将胰蛋白酶物理吸附在聚丙烯酰胺凝胶中,提高了胰蛋白酶的稳定性,有助于提高产品质量和产量,便于回收和重复使用。
主权项:1.一种肝素钠酶解精制方法,其特征在于:包括如下步骤:S1.1、称取以下重量份的原料:改性蛋白酶0.5-1重量份、粗品肝素钠45-50重量份、乙二胺四乙酸0.1-0.3重量份、抗坏血酸0.05-0.1重量份、氯化钠1-5重量份、过氧化氢3-5重量份、无水乙醇120-180重量份;其中,改性蛋白酶由胰蛋白酶和聚丙烯酰胺凝胶按质量比1:1~3通过物理吸附制备而成;S1.2、将粗品肝素钠进行粉碎过筛,然后溶解于浓度为1-5%的NaCl溶液中,加热至30-50℃下,调节pH值为8-9,保温30-50min,得到粗溶液;S1.3、向粗溶液中依次加入改性蛋白酶、乙二胺四乙酸和抗坏血酸,加热至45-55℃,酶解时间2-3h,待反应结束,将混合溶液加热至80-100℃下,保温20-30min,自然冷却至室温;S1.4、向混合溶液中加入过氧化氢溶液,在20-25℃下静置氧化处理10-12h后过滤分离得到氧化液;S1.5、向氧化液中加入无水乙醇,使用搅拌器进行搅拌,静置3-5h,用卧式离心机以3000-5000rmin转速离心分离后得下层沉淀,真空干燥后即得精品肝素钠。
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