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摘要:本发明公开了一种毛乳头细胞分离及培养方法,所述方法包括:从保留有完整的毛囊结构的组织小块中获得末端毛球,再分离出单个毛乳头,然后将其加入胶原酶A进行消化,所得酶解后的毛乳头重悬后置于预包埋处理后的培养皿中贴紧培养皿底部,然后划破毛乳头内部结构进行静置培养,待毛乳头细胞爬出后进行增殖培养,得细胞融合度达到90%以上的毛乳头细胞;其中采用的增殖培养基包括以下各组成成分:DMEMF12培养基、FBS、FGF7、EGF、氢化可的松、胰岛素、青霉素、链霉素以及两性霉素。本发明方法可获得细胞形态好、呈聚集性生长、增殖速率较快及细胞干性较好的毛乳头细胞,且获得的细胞不会提前衰老,50岁供体头皮分离的毛乳头细胞传至第7代时仍具备增殖潜能。
主权项:1.一种毛乳头细胞增殖培养基,其特征在于,所述增殖培养基包括以下各组成成分:DMEMF12培养基、FBS、FGF7、EGF、氢化可的松、胰岛素、青霉素、链霉素以及两性霉素;所述增殖培养基中,FBS的质量含量为2~8%,FGF7的浓度为15~25ngml,EGF的浓度为5~15ngml,氢化可的松的浓度为0.2~0.6μgml、胰岛素的浓度为2~8μgml、青霉素浓度为50~150Uml、链霉素浓度为0.01~1mgml、两性霉素浓度为0.1~0.4μgml。
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百度查询: 上海珈凯生物股份有限公司 一种毛乳头细胞分离及培养方法
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