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分离病毒载体的方法 

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摘要:一种分离含有病毒载体的液体样品的方法包含使所述液体样品流到阴离子交换柱中。第一病毒载体含有靶向遗传物质,并且第二病毒载体基本上不含遗传物质或含有非靶向遗传物质,其中所述靶向遗传物质不同于所述非靶向遗传物质。可以使流动相流到所述阴离子交换柱中,其中所述流动相包含缓冲溶液A和缓冲溶液B。所述缓冲溶液A和B两者均包含挥发性缓冲盐。可以将所述第一病毒载体和所述第二病毒载体分离,使得所述第一病毒载体和所述第二病毒载体在不同时间从所述阴离子交换柱洗脱,并且然后可以检测所述第一病毒载体和所述第二病毒载体。

主权项:1.一种分离洗脱腺相关病毒AAV载体的方法,所述方法包括:a使流动相流到阴离子交换柱中,其中所述流动相包括具有高pH值的第一缓冲溶液A和具有低pH值的第二缓冲溶液B的混合物,其中第一缓冲溶液A的浓度最初高于第二缓冲溶液B的浓度;b使包含AAV载体的液体样品流到所述阴离子交换柱中,其中所述AAV载体包括第一病毒载体和第二病毒载体,所述第一病毒载体含有靶向遗传物质,并且所述第二病毒载体i基本上不含遗传物质或ii含有非靶向遗传物质,其中所述靶向遗传物质不同于所述非靶向遗传物质;c通过在流动相内降低第一缓冲溶液A的浓度和提高第二缓冲溶液B的浓度,从而在流动相内产生不断降低的pH梯度,从而在不同时间洗脱所述第一病毒载体和所述第二病毒载体;其中第一病毒载体和第二病毒载体用与阴离子交换柱偶联的检测器检测;其中第一缓冲溶液A包括碳酸氢铵和氢氧化铵,和第二缓冲溶液B包括乙酸和甲酸;其中所述第一病毒载体具有第一pI,并且所述第二病毒载体具有第二pI,其中所述第一pI和所述第二pI不同,其中所述第一病毒载体和所述第二病毒载体各自包括具有基本上相同的一级蛋白质结构的蛋白质壳体。

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