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申请/专利权人:福建农林大学
摘要:本发明涉及一种提取2,3‑丁二醇单葡萄糖苷的方法,该方法以Raffaelealauricola(食菌小蠹共生真菌)为原料进行发酵,经过乙酸乙酯萃取,浓缩,经反相硅胶柱和HPLC纯化,提取该菌株次级代谢产物:2,3‑丁二醇单葡萄糖苷。本发明方法可有效提取该化合物纯品,易于大规模生产与推广应用等优点,为今后2,3‑丁二醇单葡萄糖苷在功能性药品中的应用开发提供参考。
主权项:1.一种从Raffaelealauricola中提取2,3-丁二醇单葡萄糖苷的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将Raffaelealauricola活化后,取菌块接种到PDB培养基中,在160~180rmin、20~28℃条件下连续培养5~10天,按15wt%~20wt%接种量转接到大米培养基中,继续在20~28℃条件下静置培养28~40天即次级培养,得到菌丝体;2)将步骤1)得到的菌丝体在35~40℃下干燥后研磨成粉状,用1~2倍体积乙酸乙酯浸泡12~24小时,超声40~60分钟,收集萃取液,残渣中再加入菌丝体1~2倍体积的乙酸乙酯,超声40~60分钟,收集萃取液,重复以上步骤,共得到三份萃取液合并浓缩得到粗提物浸膏;3)将粗提物浸膏用氯仿或二氯甲烷溶解,然后用反相硅胶C18进行拌样,干法装柱,以甲醇:水体积比1:9-9:1梯度洗脱,收集甲醇:水体积比为9:1部位洗脱液,旋蒸浓缩得组分A;4)将组分A通过HPLC制备分离,以流动相体积百分比4%色谱级甲醇:96%纯水等度洗脱,流速2mLmin,保留时间tR=9.6min,收集9.0min-10.0min洗脱液,悬蒸得到白色粉末状2,3-丁二醇单葡萄糖苷,其结构式如下: ;步骤1)中大米培养基组份为:大米100g,木屑10g,加入纯水120mL;经121℃高压灭菌20min备用;所述步骤3)中梯度洗脱比例为甲醇:水体积比为1:9,2:8,3:7,4:6,6:4,7:3,8:2,9:1。
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百度查询: 福建农林大学 从Raffaelea lauricola中提取2,3-丁二醇单葡萄糖苷的方法
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