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申请/专利权人：生物辐射实验室股份有限公司

摘要：方法允许提供多个珠粒的混合物，每个珠粒与寡核苷酸连接，其中所述混合物可以被视为本体溶液在分区之前，以切割将所述寡核苷酸与所述珠粒连接的共价键，同时保持所述珠粒与所述寡核苷酸之间的非共价键通过杂交，从而允许在所述寡核苷酸与所述珠粒分离之前，将所述寡核苷酸和所述珠粒分配到分区或2D阵列，所述分离例如发生在所述分区中。

主权项：1.一种从珠粒中释放寡核苷酸的方法，所述方法包括：i提供反应混合物，所述反应混合物包括：多个珠粒，每个珠粒与包括第一端序列的第一寡核苷酸共价连接；第二寡核苷酸，所述第二寡核苷酸包括第二端序列；以及连接寡核苷酸，所述连接寡核苷酸包括：i与所述第一端序列反向互补的第一末端序列；以及ii与所述第二端序列反向互补的第二末端序列，其中所述第一末端序列和所述第一端序列杂交并且具有第一熔融温度Tm，并且ii所述第二末端序列和所述第二端序列杂交并且具有第二Tm，使得所述连接寡核苷酸将所述第一寡核苷酸与所述第二寡核苷酸连接；ii将所述反应混合物的温度升高至高于所述第一Tm和所述第二Tm中的至少一者，使得所述第一寡核苷酸和所述第二寡核苷酸与所述连接寡核苷酸的至少一端解离；iii将所述反应混合物的温度降低至低于所述第一Tm和所述第二Tm，其中在所述升高之后并且在所述降低之前，所述反应混合物进一步包括阻断寡核苷酸，所述阻断寡核苷酸包括：a与所述第一端序列反向互补但不包括与所述第二端序列反向互补的多于3个连续核苷酸的序列，使得所述阻断寡核苷酸与所述连接寡核苷酸竞争与所述第一寡核苷酸杂交，从而允许所述第二寡核苷酸保持从所述珠粒释放的序列；或b与所述第二端序列反向互补但不包括与所述第一端序列反向互补的多于3个连续核苷酸的序列，使得所述阻断寡核苷酸与所述连接寡核苷酸竞争与所述第二寡核苷酸杂交，从而允许所述第二寡核苷酸保持从所述珠粒释放的序列；或c作为所述第一端序列但不包括所述第二端序列中的多于3个连续核苷酸的序列，使得所述阻断寡核苷酸与所述连接寡核苷酸竞争与所述第一寡核苷酸杂交，从而允许所述第二寡核苷酸保持从所述珠粒释放的序列；或d作为所述第二端序列但不包括作为所述第一端序列的多于3个连续核苷酸的序列，使得所述阻断寡核苷酸与所述连接寡核苷酸竞争与所述第二寡核苷酸杂交，从而允许所述第二寡核苷酸保持从所述珠粒释放的序列。

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百度查询： 生物辐射实验室股份有限公司 用于最大限度释放寡核苷酸的方法和组合物