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申请/专利权人:扬州大学
摘要:本发明属于生物工程技术领域,尤其涉一种鸡TRIM27.2截短体重组蛋白及制备方法及应用、多克隆抗体及制备方法及应用,包括以下步骤:以鸡巨噬细胞系HD11总RNA反转录后的cDNA为模版,进行PCR扩增获得编码鸡TRIM27.2截短体重组蛋白的基因,所述基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;将扩增获得的编码鸡TRIM27.2截短体重组蛋白的基因插入到pColdI载体的酶切位点之间获得重组载体;将所述原核表达载体转入到感受态细胞中,得到重组菌;将所述重组菌进行培养,当培养液的OD_600值为0.6~0.8时,加入IPTG进行诱导表达,经分离、纯化、复性,得到鸡TRIM27.2截短体重组蛋白。本发明构建的鸡TRIM27.2截短体重组蛋白,避免全长表达不稳定的缺点,同时免疫效果更加稳定且产生的抗体水平较高,制备的鸡TRIM27.2的多克隆抗体能用于验证TRIM27.2对IBDV等病毒复制调控的机制。
主权项:1.一种鸡TRIM27.2截短体重组蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:以鸡巨噬细胞系HD11总RNA反转录后的cDNA为模版,进行PCR扩增获得编码鸡TRIM27.2截短体重组蛋白的基因,所述基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;将扩增获得的编码鸡TRIM27.2截短体重组蛋白的基因插入到pColdI载体的酶切位点之间获得重组载体;将所述重组载体转入到感受态细胞中,得到重组菌;将所述重组菌进行培养,当培养液的OD600值为0.6~0.8时,加入IPTG进行诱导表达,经分离、纯化、复性,得到鸡TRIM27.2截短体重组蛋白。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 扬州大学 一种鸡TRIM27.2截短体重组蛋白及制备方法及应用、多克隆抗体及制备方法及应用
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