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申请/专利权人：上海交通大学医学院附属第九人民医院
摘要：本发明公开了利用超声刺激提高脂肪干细胞分泌胞外囊泡效率的方法及应用，包括A、脂肪干细胞提取；B、超声刺激脂肪干细胞：第三代的脂肪干细胞长满以后，PBS洗涤，更换不含血清的低糖DMEM，将一定厚度的耦合剂均匀地涂抹在细胞培养皿下方，然后将超声发生设备的换能器与耦合剂紧密贴合以排除空气，超声的剂量设置为0.5～1.5Wcm2，暴露时间为30～120s；C、提取脂肪干细胞胞外囊泡。经过验证，经超声刺激脂肪干细胞后，其分泌的囊泡数量比未经超声刺激的脂肪干细胞提高60余倍；囊泡所含蛋白量提高3倍余，且高表达囊泡特异标志物，并且在促皮肤创面愈合方面效果显著。
主权项：1.一种利用超声刺激提高脂肪干细胞分泌胞外囊泡效率的方法，其特征在于，包括如下步骤：A、人脂肪干细胞提取用IV型胶原酶对抽脂术后废弃的颗粒脂肪进行消化，提取脂肪干细胞，长满后常规传代至第3代；B、超声刺激脂肪干细胞第三代的脂肪干细胞长满以后，用PBS洗涤细胞两次，然后更换不含血清的低糖DMEM，将0.5-1cm厚度的耦合剂均匀地涂抹在10cm细胞培养皿下方，然后将超声发生设备的换能器与耦合剂紧密贴合以排除空气，使用1MHz、10Hz脉冲重复频率、60％占空比、9mm2横截面积的超声发生设备对细胞进行超声刺激，超声的剂量设置为1.5Wcm2，暴露时间为30s；C、提取脂肪干细胞胞外囊泡脂肪干细胞经超声刺激，并持续培养48小时后，收集细胞上清；用超滤法提取上清中的细胞外囊泡，溶于PBS中。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海交通大学医学院附属第九人民医院 利用超声刺激提高脂肪干细胞分泌胞外囊泡效率的方法及应用
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