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申请/专利权人：德国癌症研究中心公共法律基金会;希皮奥内治疗公司;帕诺萨姆有限公司

摘要：本发明涉及可用于产生疫苗或作为化合物递送载体的囊泡的开发。更具体而言，本发明涉及一种囊泡的制备方法，其包括以下步骤：提供表达可分选的VSG的重组布氏锥虫细胞；在存在至少一种蛋白酶抑制剂的低渗溶液中处理所述细胞，直到细胞被裂解；从溶液中分离细胞膜；将之前获得的分离的细胞膜悬浮在等渗溶液中；用超声处理处理前一步骤获得的悬浮细胞膜，以获得囊泡悬浮液；从之前获得的囊泡悬浮液中去除聚集的膜状碎片；将囊泡悬浮液分离成囊泡的种群；以及从囊泡的种群中提供囊泡，其通过以下参数表征：i具有在考马斯染色SDSPAGE后显示的单一优势蛋白，其表观分子量为55至60kDa，ii在电子显微镜下具有球形外观，和iii在电子显微镜下表现出均匀的表面结构。此外，本发明还涉及以上述参数为特征的包含可分选的VSG的囊泡，以及用于治疗和或预防疾病或医疗病症的这样的囊泡，或作为化合物递送囊泡，优选为药物递送载体，更优选为核酸递送囊泡。最后，本发明考虑一种用于实施本发明的方法的试剂盒，该试剂盒包括表达可分选的VSG的重组布氏锥虫细胞和用于实施本发明的方法的至少一种试剂，或包含本发明的囊泡的试剂盒。

主权项：1.一种囊泡的制备方法，其包括以下步骤：a提供表达VSG、优选可分选的VSG的重组布氏锥虫细胞；b在存在至少一种蛋白酶抑制剂的低渗溶液中处理所述细胞，直到细胞被裂解；c从步骤b的溶液中分离细胞膜；d将步骤c获得的分离的细胞膜悬浮在等渗溶液中；e用超声处理处理步骤d中获得的悬浮细胞膜，以获得囊泡悬浮液；f从步骤e获得的囊泡悬浮液中去除聚集的膜状碎片；g将囊泡悬浮液分离成囊泡的种群；以及h从囊泡的种群中提供囊泡，其通过以下参数表征：i具有在考马斯染色SDSPAGE后显示的单一优势蛋白，其表观分子量为55至60kDa，ii在电子显微镜下具有球形外观，和iii在电子显微镜下表现出均匀的表面结构。

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