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一种吗啡成瘾动物模型的构建方法 

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申请/专利权人:六合熙诚(北京)信息科技有限公司

摘要:本发明提供的一种吗啡成瘾动物模型的构建方法,所述构建方法包括:建立成瘾SD大鼠模型;训练倾向性程序构建的CPP模型;获取不同时间节点的数据;评定戒断症状;通过对mPFC、VTA和NAc区5‑HTT和5‑HT1AR的测定,通过SD大鼠外显行为和生物分子学层面的结果验证。符合成瘾的自然过程,且通过多维度的验证后,在临床和分子生物学层面均符合成瘾的临床表现和生物学基础,评价药物的奖赏效应以及服用者的渴求程度和依赖症状,是测评动物对药物奖赏敏感性很好的模型。

主权项:1.一种吗啡成瘾动物模型的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括:建立成瘾SD大鼠模型;训练倾向性程序构建的CPP模型;获取不同时间节点的数据;评定戒断症状;通过对mPFC、VTA和NAc区5-HTT和5-HT1AR的测定,通过SD大鼠外显行为和生物分子学层面的结果验证;数据预处理,包括:采集无标本时的纯背景图像,应用背景图像对原始图像进行阴影校正,以校正背景照度的不均匀;通过从图像中减去染色阴性对照标本图像中各脑区的平均灰度,来校正染色中的非特异性染色;所述训练倾向性程序构建的CPP模型采用非平衡法训练,包括预测试阶段和训练阶段;所述预测试阶段测试大鼠的自然位置偏爱,以非自然偏爱侧为伴药侧训练大鼠,建立条件反射;所述训练阶段对吗啡组大鼠随机分为两种处理方式;第一处理方式为:先注射生理盐水放入自然偏爱侧,再注射吗啡放入伴药侧;第二处理方式为:先注射吗啡放入伴药侧,再注射生理盐水放入自然偏爱侧;对照组按放入黑白箱次序不同随机分为先注射生理盐水放入黑侧和先注射生理盐水放入白侧两种处理方式;用分子生物学实验进行模型的理论基础验证;吗啡依赖生物学层面的验证用原位杂交技术对各脑区5-HTTmRNA和5-HT1ARmRNA的灰度值进行检测和比较;通过末次CPP测评的非自然偏爱侧停留时间减去预测试时非自然偏爱侧停留时间计算CPP值,以CPP值和戒断症状进行评定;模型的验证采用临床和生物两个维度进行评定;通过多维度的验证后,在临床和分子生物学层面均符合成瘾的临床表现和生物学基础,评价药物的奖赏效应以及服用者的渴求程度和依赖症状。

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