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检测ZFY基因的巢式PCR特异性引物、试剂盒及母猪早期妊娠诊断方法 

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申请/专利权人:石河子大学

摘要:本发明属于早期妊娠诊断技术领域,尤其涉及一种检测ZFY基因的巢式PCR特异性引物、试剂盒及母猪早期妊娠诊断方法。所述检测ZFY基因的巢式PCR特异性引物包括外侧引物和内侧引物,外侧引物和内侧引物的核苷酸序列分别如SEQIDNO:1‑4所示。本发明通过两对灵敏度高、特异性强的引物,以母猪外周血中cffDNA为模板,第一轮外侧引物扩增增加了PCR的特异性,第二轮内部引物加强了PCR的灵敏度,通过两轮扩增,可以在妊娠第20天检测出母猪是否妊娠,检测结果准确性大大提高,为生猪养殖业尽早发现未妊娠母猪进行复配或淘汰决策、降低非生产天数和生产成本和提高母猪生产性能及经济效益提供了有力的技术支撑。

主权项:1.一种检测ZFY基因的母猪早期妊娠诊断方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、采集配种20天的母猪外周血样,提取所述母猪外周血样本中的DNA;S2、以步骤S1提取的所述DNA为模板,利用外侧引物进行第一轮扩增,所述外侧引物包括上游引物ZFY-O-F和下游引物ZFY-O-R,核苷酸序列分别如SEQIDNO:1-2所示,所述第一轮扩增的扩增产物大小为358bp;S3、以所述第一轮扩增的扩增产物为模板,利用内侧引物进行第二轮扩增,所述内侧引物包括上游引物ZFY-I-F和下游引物ZFY-I-R,核苷酸序列分别如SEQIDNO:3-4所示,所述第二轮扩增的扩增产物大小为154bp;S4、检测所述第二轮扩增的扩增产物,判断母猪是否妊娠;若出现片段大小为154bp的条带,判断母猪妊娠,若无条带,判断母猪未妊娠。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 石河子大学 检测ZFY基因的巢式PCR特异性引物、试剂盒及母猪早期妊娠诊断方法

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