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申请/专利权人:上海海洋大学;上海市环境科学研究院
摘要:本发明公开了一种基于多重PCR扩增的长江江豚环境DNA检测方法,包括以下步骤:1利用多重PCR方法建立检测长江江豚环境DNA用的引物组合;2水样抽提:采集水样,然后用微孔滤膜抽滤水样,抽滤后将滤膜放至灭菌离心管;3eDNA提取:利用CTAB法提取滤膜上的eDNA;4多重PCR扩增:利用步骤1中所述的引物组合对提取所得eDNA进行多重PCR扩增反应,得到扩增产物;5电泳检测:对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,电泳结束后在凝胶成像仪中观察亮带情况以判断有无长江江豚的存在。本发明利用多重PCR技术多位点引物组合,检测长江江豚环境DNA的存在,具有较高的特异性、灵敏性和准确性。
主权项:1.基于多重PCR扩增的长江江豚环境DNA检测方法,其特征在于,包括以下步骤:1利用多重PCR方法建立检测长江江豚环境DNA用的引物组合;2水样抽提:采集水样,然后用微孔滤膜抽滤水样,抽滤后将滤膜放至灭菌离心管;3eDNA提取:利用CTAB法提取滤膜上的eDNA;4多重PCR扩增:利用步骤1中所述的引物组合对提取所得eDNA进行多重PCR扩增反应,得到扩增产物;5电泳检测:对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,电泳结束后在凝胶成像仪中观察亮带情况,根据是否出现目标片段的亮带判断有无长江江豚的存在。
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权利要求:
百度查询: 上海海洋大学 上海市环境科学研究院 基于多重PCR扩增的长江江豚环境DNA检测方法
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