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申请/专利权人:中国农业大学
摘要:本发明公开了一种RNA‑Seq建库的方法,包括如下步骤:首先提取样品RNA,进行反转录,获得RNADNA杂交链;然后采用磁珠法对制备的杂交链进行浓缩和纯化;采用Tn5片段化RNADNA杂交链,最后PCR扩增建库。本发明通过条形码和分子识别器,在逆转录酶的作用下,结合mRNA的3ʹ末端,并形成互补cDNA链,通过条形码区分每个样本,之后将不同样本产生的cDNA进行混样,利用磁珠进行纯化和富集,之后利用Tn5片段化杂交链,并将特定的测序适配器加到杂交链上,然后通过PCR扩增并富集转录本的3ʹ端,简化了建库过程,节省了试剂和耗材量,减少文库测序和分析所需的测序数据量。
主权项:1.一种RNA-Seq建库的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)提取样品RNA,进行反转录,获得RNADNA杂交链;所述反转录采用的引物包括条形码和分子识别器;(2)采用磁珠法对步骤(1)制备的RNADNA杂交链进行浓缩和纯化;(3)采用Tn5片段化RNADNA杂交链;(4)PCR扩增建库;所述PCR引物包括条形码。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国农业大学 一种RNA-Seq建库的方法
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