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申请/专利权人:重庆医科大学
摘要:本发明公开了一种高精度皮肤损伤时间推断方法,涉及损伤时间推断技术领域;包括如下步骤:S1:取健康成年SD雄性大鼠剃毛备皮后在大鼠背部正中用手术刀切出纵向皮肤全层切创,创口自然止血,不包扎、不给药;S2:将大鼠分为皮肤损伤愈合实验组和死后变化影响实验组,皮肤损伤愈合实验组分为:正常对照NC,皮肤切创分多个时间段进行,每个时间段随机分配3只大鼠,统一用镊子和刀片提取伤口的痂皮备检;S3:运用二代测序技术获取小鼠皮肤损伤愈合过程中的mRNA表达谱;本发明通过筛选伤口愈合结痂过程中差异表达mRNA,建立推断结痂时间的机器学习模型,准确推断皮肤损伤时间,为损伤时间推断提供了更加可靠的证据和严谨的鉴别方法。
主权项:1.一种高精度皮肤损伤时间推断方法,其特征在于,包括如下步骤:S1:取健康成年SD雄性大鼠剃毛备皮后在鼠背部正中用手术刀切出纵向皮肤全层切创,创口自然止血,不包扎、不给药;S2:将大鼠分为皮肤损伤愈合实验组和死后变化影响实验组,皮肤损伤愈合实验组分为:正常对照NC,皮肤切创分多个时间段进行,每个时间段随机分配3只大鼠,统一用镊子和刀片提取伤口的痂皮备检;S3:运用二代测序技术获取小鼠皮肤损伤愈合过程中的mRNA表达谱;S4:筛选稳定表达的mRNA,作为mRNA候选内参基因,筛选稳定上调或者下调的mRNA,作为mRNA候选目的基因;二代测序技术高通量测序,其引入了可逆终止末端,从而实现边合成边测序,在DNA复制过程中通过捕捉新添加的碱基所携带的特殊标记来确定DNA序列;S5:运用定量逆转聚合酶链反应技术检测皮肤损伤愈合过程中mRNA候选内参基因与常用内参基因的表达量及变化趋势,运用GeNorm、NormFinder、BestKeeper和ΔCt比较法综合评价这些基因的稳定性,用人体皮肤样品检验动物实验中评定为最稳定的内参基因的稳定性,用相关分析评价选定的miRNA内参基因的表达是否受年龄影响,最终得出皮肤损伤愈合过程中mRNA内参基因体系;S6:运用定量逆转聚合酶链反应技术检测皮肤损伤愈合过程中mRNA候选目的基因的表达量及变化趋势,最终建立损伤时间的机器学习模型。
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百度查询: 重庆医科大学 一种高精度皮肤损伤时间推断方法
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