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快速大量扩增脂肪间充质干细胞的方法及得到的脂肪间充质干细胞 

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申请/专利权人:优赛生命科学发展有限公司

摘要:本发明公开了一种快速大量扩增脂肪间充质干细胞的方法及得到的脂肪间充质干细胞,通过对分离、复苏、传代的脂肪间充质干细胞扩增培养,在较短的时间内获得大量、高纯度的具有生物活性的脂肪间充质干细胞。其特征在于,本发明的脂肪间充质干细胞扩增培养方法,在细胞分离、复苏、传代培养初期,加入基础培养基MEM‑α、胎牛血清、碱性成纤维细胞生长因子,在分离细胞融合度达10%或接种细胞24‑48h后加入血小板裂解物,可短时间内实现脂肪间充质干细胞大量、快速扩增,收获的细胞CD73、CD90、CD105阳性率大于95%,CD44、CD45、CD19、CD34、CD14、HLA‑DR阳性率小于2%。为体外大规模扩增脂肪间充质干细胞和相关研究及临床试验提供便利。

主权项:1.一种快速大量扩增脂肪间充质干细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:1取脂肪间充质干细胞,用脂肪间充质干细胞培养基,重悬细胞沉淀,过滤,计数,根据计数结果,按照2-3×104cm2接种量将细胞接种到培养瓶中,补加脂肪间充质干细胞培养基,放入培养箱中继续培养;细胞培养24-48小时后,按照3%-7%体积分数加入血小板裂解物,放入培养箱中培养,细胞培养至融合度达80%,用质量百分比浓度0.9%氯化钠注射液清洗细胞一次,加入Tryple消化液使细胞从培养瓶底部脱落,离心回收细胞;所述脂肪间充质干细胞培养基为MEM-α培养基,培养基中含有体积分数5%-15%胎牛血清、终浓度100-200IUml碱性成纤维细胞生长因子;2重复步骤1,进行脂肪间充质干细胞连续传代扩增。

全文数据:

权利要求:

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