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申请/专利权人:美益添生物医药(武汉)有限公司
摘要:本发明提供一种抗体筛选方法及O104:H4菌株分离方法,属于菌株分离技术领域。所述抗体筛选方法包括:表达并纯化得到O104OAP‑fliC融合蛋白;进行免疫和细胞融合得到杂交瘤细胞株;对杂交瘤细胞株进行培养和纯化得到第一单克隆抗体及第二单克隆抗体。本发明采用两种特异性蛋白基因片段进行串联,然后利用大肠杆菌进行重组表达,得到的融合蛋白,可以在一次细胞融合筛选出两种不同靶点的抗体,从而能够利用识别不同靶蛋白的特性用于O104:H4菌株分离,能提高覆盖率减少脱靶,从而更高效的进行O104:H4菌株分离,能够解决跨膜蛋白在大肠杆菌O104:H4型的分离和获取中所面临的难表达、分离效率低的问题。
主权项:1.一种抗体筛选方法,其特征在于,包括:表达并纯化得到O104OAP-fliC融合蛋白;对所述O104OAP-fliC融合蛋白进行免疫和细胞融合,得到能识别O104OAP抗体和fliC抗体的杂交瘤细胞株;对能识别O104OAP蛋白和fliC蛋白的杂交瘤细胞株进行无血清培养和纯化,得到能识别O104OAP蛋白的第一单克隆抗体,以及能识别fliC蛋白的第二单克隆抗体。
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