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申请/专利权人：奥明星程(杭州)生物科技有限公司
摘要：本发明提供一种cfDNAjagged序列文库制备连接方法，通过先对双链cfDNA进行加热变性成单链DNA，再对cfDNA单链直接进行5'端接头连接、3'端接头连接，之后对纯化后的3'接头连接产物进行PCR扩增，最后进行常规测序。本发明方法针对单链cfDNA设计了全新的非对称接头，P5接头为单链，进行了3端磷酸化；P7接头为非对称双链，进行了5端磷酸化，从而最大限度减少接头二聚体的产生；而且本发明方法中，P5接头连接后无需延伸和纯化，直接进行P7接头连接，不仅节省了磁珠的使用，而且避免了连接产物的损失和浪费。
主权项：1.一种cfDNAjagged序列文库制备连接方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）对双链cfDNA进行加热变性成为单链DNA；（2）对步骤（1）所得单链DNA进行5'端接头连接；其中，所述5'端接头的序列具体为：5'-AATCGGCCATTGCCATTGCAAT-P-3；（3）对步骤（2）所得连接产物进行3'端接头连接；其中，所述3'端接头的序列具体为：5’-p-AGTTAACCGCGCGTACTCCGATCGGC-3’3’-ATGCAGTCAATTGGCGCGCATGAGGCTAGCCG-5’；（4）对纯化后的3'接头连接产物进行PCR扩增；（5）文库质检，合格后进行混样和送测序。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 奥明星程(杭州)生物科技有限公司 一种cfDNA jagged序列文库制备连接方法
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