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申请/专利权人：华南农业大学
摘要：本发明公开了一株巨大口蘑Sh‑TYR7523沉默菌株的构建及其应用，该菌株的构建方法包括以下步骤：将沉默载体ptck‑TYR7523转化至农杆菌EHA105中，获得拟转化子；将拟转化子用IM液体培养基重悬，得到IM菌液；挑取巨大口蘑SCAU4菌块与IM菌液共培养，然后转移至含有Hyg和Cef的PDA筛选培养基上筛选，得到的阳性转化子为巨大口蘑Sh‑TYR7523沉默菌株。本发明成功构建TYR7523基因沉默载体，并成功将其导入巨大口蘑SCAU4菌丝中，经传代培养，覆土出菇后，成功获得一株巨大口蘑沉默菌株Sh‑TYR7523，得到的沉默菌株Sh‑TYR7523相比于出发菌株的耐贮藏性能增强。
主权项：1.用于沉默巨大口蘑TYR7523基因的沉默载体的构建方法，其特征在于包括以下步骤：1设计带有SpeⅠ和SacⅠ酶切位点的引物U7-FU7-R，以巨大口蘑SCAU4的cDNA为模板来扩增TYR7523基因正向片段，命名为TYR7523-up；2利用SpeⅠ和SacⅠ快切酶对ptck303载体进行酶切，回收得到线性载体ptck303；3将步骤1获得的TYR7523基因正向片段与步骤2获得的线性载体ptck303进行连接，获得ptck-TYR7523-up中间载体；4设计带有BamHⅠ和KpnⅠ酶切位点的引物D7-FD7-R，以巨大口蘑SCAU4的cDNA为模板来扩增TYR7523基因反向片段，命名为TYR7523-down；5利用BamHⅠ和KpnⅠ快切酶对ptck-TYR7523-up中间载体进行酶切，回收得到线性载体ptck-TYR7523-up；6将步骤4获得的TYR7523基因反向片段和步骤5获得的线性载体ptck-TYR7523-up进行连接，获得ptck-TYR7523沉默载体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华南农业大学 一株巨大口蘑Sh-TYR7523沉默菌株的构建及其应用
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