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一种重组抗CD19-CD3双特异性抗体Fab片段生产用纯化方法 

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申请/专利权人:白帆生物科技(上海)有限公司

摘要:本发明公开了一种重组抗CD19‑CD3双特异性抗体Fab片段生产用纯化方法,包括步骤:亲和层析过程,CHO培养物上清液经除菌过滤后上样至亲和层析填料中,依次在亲和层析填料上加载第一平衡液、第一及第二淋洗液、第一洗脱液,收集得到亲和层析洗脱产物,实现亲和层析;阳离子交换层析过程,亲和层析洗脱产物上样到阳离子层析填料中,在阳离子层析填料上加载第二平衡液,经第二洗脱液线性洗脱后,收集得到重组抗CD19‑CD3双特异性抗体Fab片段。本发明经两步层析后,可得到纯度高达99%的产物,且回收率大于90%,本发明的重组抗CD19‑CD3双特异性抗体Fab片段的纯化方法步骤少,解决现有技术存在的低回收率,低纯度,生产不易放大的问题,同时使用国产填料,经济效益更高。

主权项:1.一种重组抗CD19-CD3双特异性抗体Fab片段生产用纯化方法,其特征在于,包括步骤:S1:亲和层析过程:表达重组抗CD19-CD3双特异性抗体Fab片段的CHO细胞培养物经离心、除菌过滤后上样至亲和层析填料中,依次在亲和层析填料上加载第一平衡液、第一第二淋洗液,最后加载第一洗脱液收集得到亲和层析洗脱产物,实现亲和层析;S2:阳离子交换层析过程:亲和层析洗脱产物经调样、过滤后上样到阳离子层析填料中,依次在阳离子层析填料上加载第二平衡液,经第二洗脱液线性洗脱后,收集得到重组抗CD19-CD3双特异性抗体Fab片段。

全文数据:

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