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申请/专利权人：重庆国科医创科技发展有限公司
申请日：2024-04-18
公开（公告）日：2024-07-05
公开（公告）号：CN118291656A
主分类号：C12Q1/689
分类号：C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/22
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.07.23#实质审查的生效;2024.07.05#公开
摘要：本发明公开了一种肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌双重直接检测方法及试剂盒，该方法为：通过高温裂解酶裂解肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌释放核酸，同时利用分子信标探针在同一体系下对UreD基因和KPC基因进行环介导核酸恒温扩增；再对不同荧光信号进行检测，就可以实现两种的检测。本发明采用耐高温裂解酶裂解肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌释放核酸，从而能在同一管内完成肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的直接一锅法LAMP扩增检测，无需基因组DNA的提取，具有操作简单、耗时短、准确度高等优势；这些优势使得本发明能够方便用于对肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的基层快速检测和鉴定诊断。
主权项：1.一种肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌双重直接检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、采集待测菌液样本；S2、采用单管恒温扩增体系同时进行肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的双重直接检测：将待测菌液样本加入恒温扩增体系中，进行恒温扩增，然后对扩增产物进行双通道荧光检测，根据两个通道的荧光强度判断待测菌液样本中是否含有肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌；其中，恒温扩增体系中包含用于裂解细菌的裂解酶、用于扩增肺炎克雷伯菌特有的UreD基因的扩增引物组1、用于扩增耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌特有的KPC基因的扩增引物组2、用于检测UreD基因的分子信标探针1和用于检测KPC基因的分子信标探针2。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 重庆国科医创科技发展有限公司 肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌双重直接检测方法及试剂盒
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