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申请/专利权人：迈杰转化医学研究(苏州)有限公司
摘要：本发明涉及一种检测PBMC中SHP2抑制剂活性的试剂盒及其方法，所述试剂盒中包括刺激剂GM‑CSF和检测总ERK及磷酸化ERK的试剂。本发明找到了一种合适的刺激剂GM‑CSF，其能够在一个较大的窗口内提升PBMC中ERK的磷酸化信号，通过检测ERK蛋白的磷酸化水平变化，能够很敏感的反映SHP2抑制剂对于磷酸化ERK的抑制效果，来间接评估SHP2抑制剂的活性。解决了SHP2抑制剂实体瘤研究中的一个痛点：即如何在不手术或穿刺取肿瘤组织的情况下，去方便并且能够及时的监控SHP2抑制剂的药效。
主权项：1.一种非诊断目的的检测PBMC中SHP2抑制剂活性的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：将PBMC待测样本与刺激剂GM-CSF混合，室温孵育5min后，离心，收集PBMC细胞沉淀，裂解后，检测裂解液中ERK总信号值及磷酸化ERK的信号值，计算磷酸化ERK的占比；对不含有SHP2抑制剂的PBMC对照样本进行与上述PBMC待测样本同样的操作；根据待测样本与对照样本的检测结果，计算得到SHP2抑制剂对ERK磷酸化的抑制率，抑制率越高说明待测样本中SHP2抑制剂的活性越强；所述混合得到的体系中，PBMC与GM-CSF的比例为2-5×107个细胞10-100ng。
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权利要求：
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