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一种抗人H3K27me3蛋白兔单克隆抗体及其应用 

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申请/专利权人:北京中杉金桥生物技术有限公司

摘要:本发明涉及一种抗人H3K27me3蛋白兔单克隆抗体及其应用,涉及抗体技术领域,包括兔单克隆抗体,所述兔单克隆抗体为OTIR6D5;其制备方式包括以下步骤:S1:合成H3蛋白的第25‑44位氨基酸,在第27位的赖氨酸的氨基做三甲基化修饰,在肽链的N端偶联KLH作为免疫原,氨基酸序列如SEQIDNO.1,上述免疫原通过注射免疫新西兰大白兔;S2:获取免疫动物的外周血单核细胞PBMCs,分选特异性B细胞;S3:经分子克隆、重组载体转染至哺乳动物细胞中;S4:培养细胞获得含分泌抗体的上清,将上清经亲和层析纯化获得抗H3K27me3的兔单克隆抗体。本发明中,抗人H3K27me3蛋白兔单克隆抗体可与H3K27me3蛋白特异性结合,显著提高了H3K27me3蛋白免疫检测的特异性、准确性和可靠性,可适用于各类组织中H3K27me3蛋白的标记。

主权项:1.一种抗人H3K27me3蛋白兔单克隆抗体及其应用,包括兔单克隆抗体,其特征在于:所述兔单克隆抗体为OTIR6D5;其制备方式包括以下步骤:S1:合成H3蛋白的第25-44位氨基酸,在第27位的赖氨酸的氨基做三甲基化修饰,在肽链的N端偶联KLH作为免疫原,氨基酸序列如SEQIDNO.1,上述免疫原通过注射免疫新西兰大白兔;S2:获取免疫动物的外周血单核细胞PBMCs,分选特异性B细胞;S3:经分子克隆、重组载体转染至哺乳动物细胞中;S4:培养细胞获得含分泌抗体的上清,将上清经亲和层析纯化获得抗H3K27me3的兔单克隆抗体。

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