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申请/专利权人：上海烟草集团有限责任公司;上海烟草集团北京卷烟厂有限公司

摘要：本发明涉及烟草成分检测领域，尤其涉及一种同时测定烟草中10种Amadori化合物的方法。所述方法采用在线SPE‑LC‑MSMS分析方法进行测定；其中，所述在线SPE采用HySphereMManion阴离子交换柱对样品进行在线净化。本发明的方法采用全自动固相萃取技术在线纯化烟草样品，固相萃取方式自动化操作更加简便，可实现样品高通量分析，显著提高检测效率，减少人为误差，提高检测准确性；同时，经在线SPE处理后的烟草样品，基线噪声更小，干扰峰明显减少，基质效应减小，大大降低了烟草样品对检测系统的污染，提高了检测重复性和灵敏度，延长了液质系统的使用寿命。

主权项：1.一种同时测定烟草中10种Amadori化合物的方法，其特征在于，采用在线SPE-LC-MSMS分析方法进行测定；其中，所述在线SPE采用HySphereMManion阴离子交换柱对样品进行在线净化；所述Amadori化合物包括葡萄糖胺、果糖-苯丙氨酸、果糖-天冬酰胺、果糖-亮氨酸、果糖-异亮氨酸、果糖-色氨酸、果糖-缬氨酸、果糖-谷氨酸、果糖-脯氨酸、果糖-丙氨酸；所述HySphereMManion阴离子交换柱采用0.8~2mL甲醇、以2~5mLmin的流速进行活化；采用0.8~2mL2%的氨水、以2~5mLmin的流速进行平衡；采用0.4~0.8mL2%的氨水、以0.4~0.8mLmin的流速进行上样；采用0.5~1.0mL2%的氨水，以1~2mLmin的流速进行洗涤，洗脱时间为8~15min；LC-MSMS条件如下：色谱柱：五氟苯基丙基硅胶柱；色谱柱的规格为DiscoveryHSF5-3，150mm×2.1mm，3.0μm；流动相A：0.05~0.2%的甲酸水溶液；流动相B：乙腈；流速：0.2~0.4mLmin；柱温：40~60℃；进样量为：5~20μL；采用梯度洗脱，以所述流动相的总体积为100%计，在第0~7.0min，所述流动相A的体积由100%递减为90%，所述流动相B的体积由0%递增为10%；在第7.1~11.0min，所述流动相A的体积由90%递减为40%，所述流动相B的体积由10%递增为60%；在第11.0~13.0min，所述流动相A的体积为40%，所述流动相B的体积为60%；在第13.1~15.0min，所述流动相A的体积为5%，所述流动相B的体积为95%；在第15.1~18.0min，所述流动相A的体积为100%，所述流动相B的体积为0%。

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