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恭喜华南农业大学李向梅获国家专利权

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龙图腾网恭喜华南农业大学申请的专利一种基于磁助普鲁士蓝纳米酶-DAB底物检测沙丁胺醇的探针平台和方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114791488B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210153498.X,技术领域涉及:G01N33/531;该发明授权一种基于磁助普鲁士蓝纳米酶-DAB底物检测沙丁胺醇的探针平台和方法是由李向梅;梁锦璇;刘志威;江佳丽;雷红涛;黄日明设计研发完成,并于2022-02-18向国家知识产权局提交的专利申请。

一种基于磁助普鲁士蓝纳米酶-DAB底物检测沙丁胺醇的探针平台和方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于磁助普鲁士蓝纳米酶‑DAB底物检测沙丁胺醇的探针平台和方法。所述基于磁助普鲁士蓝纳米酶‑DAB底物检测沙丁胺醇的探针平台包括磁助普鲁士蓝纳米酶和二氨基联苯胺底物,所述磁助普鲁士蓝纳米酶为Fe3O4内核和普鲁士蓝外壳的核壳复合物。本发明开发了一种基于磁助普鲁士蓝纳米酶‑DAB底物检测沙丁胺醇的探针平台,一方面,联合二氨基联苯胺底物氧化可将磁助普鲁士蓝纳米酶的信号强度放大2倍以上;另一方面基于磁助普鲁士蓝纳米酶可对样品中的分析物进行富集浓缩,可将分析灵敏度提高10倍以上。

本发明授权一种基于磁助普鲁士蓝纳米酶-DAB底物检测沙丁胺醇的探针平台和方法在权利要求书中公布了:1.一种基于磁助普鲁士蓝纳米酶-DAB底物检测沙丁胺醇的方法,其特征在于,其包括以下步骤:一合成探针偶联有沙丁胺醇抗体的磁助普鲁士蓝纳米酶的合成方法,具体包括以下步骤:1磁纳米颗粒合成:将2g六水合三氯化铁和1g柠檬酸三钠溶解在20mL乙二醇中并剧烈搅拌60min;随后加入1g醋酸钠继续剧烈搅拌30min,得混合液;之后将上述混合液转移到高压反应釜中,放置于200℃高温烘箱中反应12h;经过冷却后将反应釜内混合物倒出,用磁铁收集棕黑色产物,然后分别用无水乙醇和水洗涤产物3次后置于80℃真空干燥箱中干燥12h,最后收集深棕色粉末,置于4℃条件下储存备用;2磁助普鲁士蓝合成:取10mg步骤1的深棕色粉末加入15mL含有浓度均为3mM的铁氰化钾和六水合三氯化铁的溶液中,室温剧烈搅拌反应,溶液颜色从深棕色逐渐变为深绿色,最后用磁铁收集深绿色产物,用超纯水洗涤3次后复溶到25mL超纯水中,置于4℃储存备用;所合成的磁助普鲁士蓝纳米酶颗粒平均直径为300~320nm;3探针合成:向1mL步骤2磁助普鲁士蓝溶液中加入10μg沙丁胺醇单克隆抗体,在剧烈涡旋震荡下反应30min后加入30μL的质量浓度wv为20%的牛血清蛋白,继续反应30min后用磁铁收集沉淀物,并用0.02MpH8.0的硼酸缓冲溶液洗涤2次后用相同溶液复溶到400μL,置于4℃备用;二检测沙丁胺醇试纸条的组装检测沙丁胺醇的试纸条包括样品垫、硝酸纤维素膜、吸水纸、PVC底板;其中,样品垫用0.1MpH7.4的磷酸盐缓冲溶液浸润后置于37℃烘箱烘干12h后切成15mm备用;将包被抗原-沙丁胺醇-卵清蛋白复合物0.8mgmL和羊抗鼠IgG0.9mgmL喷涂在硝酸纤维素膜上形成检测线质控线,两线间距为7mm,随后将其置于37℃烘箱中烘干12h备用;商用吸水纸不经过处理,切成25mm备用;在PVC底板上依次粘贴样品垫、硝酸纤维素膜和吸水纸,各部分之间重叠2mm,并裁剪成3.5mm宽的长条备用;三沙丁胺醇的检测方法3.1样品前处理:猪尿样品不经过处理直接检测;猪肉样品剔除脂肪后用绞肉机绞碎并均质,随后称取5g猪肉样品于50mL离心管中,加入5mL0.05MpH7.4的磷酸盐缓冲溶液提取3min后在室温下6000rpm离心10min取上清待测;3.2检测步骤:将1mL样品或样品提取液置于离心管中,加入2μL步骤一制备的探针,室温孵育8min后置于磁力架中磁吸3min,随后弃去上清液并用150μL0.02M磷酸缓冲液复溶后全部转移到微孔中;随后将步骤二制备的试纸条插入微孔反应3min后弃去样品垫,加入2μL二氨基联苯胺进行氧化反应2min后进行结果判读和读数。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人华南农业大学,其通讯地址为:510642 广东省广州市天河区五山路483号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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