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恭喜浙江大学王智烨获国家专利权

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龙图腾网恭喜浙江大学申请的专利一种基于组织特异基因编辑技术制备耐低磷水稻的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117757800B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-11发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311430790.2,技术领域涉及:C12N15/29;该发明授权一种基于组织特异基因编辑技术制备耐低磷水稻的方法是由王智烨;魏广博设计研发完成,并于2023-10-31向国家知识产权局提交的专利申请。

一种基于组织特异基因编辑技术制备耐低磷水稻的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于组织特异基因编辑技术制备耐低磷水稻的方法,以组织特异性的基因敲除技术为基础,特异性地在水稻维管组织中敲除水稻磷吸收利用的负调控基因,制备耐低磷高产水稻材料的技术。本发明以CRISPRCas9系统为框架,使用水稻中的维管组织特异基因启动子OsPHO1;2p和OsSHR1p序列代替传统的35s启动子、ubi启动子等组成型启动子序列,构建新型的组织特异性的水稻体细胞基因编辑载体。选择两组不同的靶基因,构建了一套磷吸收负调控基因在维管细胞被特异性敲除的转基因水稻材料。该材料在低磷土壤培养条件下相对于野生型产量显著增加,平均增加78%,且该系统可以稳定遗传,不同代间表型稳定。

本发明授权一种基于组织特异基因编辑技术制备耐低磷水稻的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于组织特异基因编辑技术制备耐低磷水稻的方法,其特征在于:采用CRISPRCas9基因编辑技术,特异性地敲除水稻维管组织中的磷吸收利用的负调控基因OsPHO2或OsSPX12;所述CRISPRCas9基因编辑技术,是以pYLCRISPRubi-Cas13-eGFP多靶点载体为骨架,将Cas13片段替换为Cas9蛋白片段后,以来自水稻基因OsPHO1;2的启动子OsPHO1;2p或来自水稻基因OsSHR1的启动子OsSHR1p作为维管组织特异性启动子,制备基因编辑载体;还包括Cas9的C端具有eGFP标签;靶向基因OsPHO2的两个gRNA分别是由OsU3启动子表达的gRNAOspho2-t1,靶点序列ccaagctggacaagatgttc和由OsU6a启动子表达的gRNAOspho2-t2,靶点序列为aacccaaatttgtatgagtc;靶向基因OsSPX1的两个gRNA分别由OsU3启动子表达的gRNAOsspx1-t1,靶点序列为ggacaagttcttgtcgtaca和由OsU6a启动子表达的gRNAOsspx1-t2,靶点序列为ccgcatgaagcccgcctcct;靶向基因OsSPX2的两个gRNA由OsU6c启动子表达的gRNAOsspx2-t1,靶点序列为cgagcaagcggcgtcgcgt和由OsU6b启动子表达的gRNAOsspx2-t2,靶点序列为gaggtgatgcgcgtgagga;通过BamHI和SpeI酶切及同源重组的方式,以来自水稻基因OsPHO1;2的启动子OsPHO1;2p或来自水稻基因OsSHR1的启动子OsSHR1p替换pYLCRISPRubi-Cas9-eGFP多靶点载体骨架中的ubi启动子,其中,启动子OsPHO1;2p的序列如SEQIDNO:1所示,启动子OsSHR1p的序列如SEQIDNO:2所示;所述基因编辑载体为OsPHO1;2p:Cas9-eGFP;Ospho2、OsPHO1,2p:Cas9-eGFP;Osspx12、OsSHR1p:Cas9-eGFP;Ospho2或OsSHR1p:Cas9-eGFP;Osspx12中的一种;Cas9的基因序列如SEQIDNO:3所示。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人浙江大学,其通讯地址为:310000 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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