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摘要:本发明提供了一种提高球孢白僵菌毒力的多聚病毒科双链RNA真菌病毒,其包含SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5和SEQIDNO:6所示的核苷酸序列;以及所述多聚病毒科双链RNA真菌病毒用于提高球孢白僵菌的毒力的用途。本发明还提供了含有所述多聚病毒科双链RNA真菌病毒的球孢白僵菌菌株。
主权项:1.一种检测球孢白僵菌Beauveriabassiana是否为脱毒菌株的方法,其中所述的球孢白僵菌的保藏号为CGMCCNo.22429,所述的脱毒指所述的孢白僵菌未感染多聚真菌病毒,并将球孢白僵菌可能携带的真菌病毒命名为Beauveriabassianapolymycovirus4BbPmV-4;所述的方法包括如下步骤:1分离球孢白僵菌的单孢,接种在PDA平板放置26℃的恒温培养箱暗培养5d,切取菌丝尖端接种于新的PDA平板进行培养,连续切取菌丝尖端继代培养5代;2提取菌株的dsRNA,并进行DNaseI和S1核酸酶处理,利用1%琼脂糖凝胶电泳进行检测,进行初步筛选,得到无dsRNA菌株,其中以原始菌株为阳性对照;3利用RT-PCR检测菌株是否脱毒:对于初步筛选菌株进行总RNA提取,使用N6随机引物为反转录引物扩增,得到cDNA模板,利用病毒特异性引物对于病毒退行序列进行PCR扩增,采用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物中是否存在dsRNA;其中,步骤3中反转录引物为N6随机引物10pmμL;步骤3中的PCR中病毒特异性引物对为: PCR体系为:
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百度查询: 吉林省农业科学院 一种提高球孢白僵菌毒力的真菌病毒及其传毒方法
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