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一种固相合成RNA的后处理方法及其应用 

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摘要:本发明涉及一种固相合成RNA的后处理方法及其应用。所述固相合成RNA的后处理方法包括:将固相合成得到的RNA与氨解试剂混合进行氨解处理,将氨解处理后的RNA与脱保护试剂混合,进行脱保护处理,所述氨解试剂包括氨气甲醇溶液。本发明利用氨气甲醇溶液进行氨解,能够有效降低氨解过程中RNA的降解,提高RNA的纯度和收率,通过脱保护处理,能够得到保留DMT基团的RNA,利于利用HPLC进行纯化。

主权项:1.一种固相合成RNA的后处理方法,其特征在于,所述固相合成RNA的后处理方法包括:将固相合成得到的RNA与氨解试剂混合进行氨解处理,将氨解处理后的RNA与脱保护试剂混合,进行脱保护处理;所述氨解试剂包括氨气甲醇溶液;所述氨气甲醇溶液中氨气的浓度为2~7molL;所述脱保护试剂包括N-甲基吡咯烷酮、三乙胺和三乙胺三氢氟酸盐;所述脱保护试剂中N-甲基吡咯烷酮、三乙胺和三乙胺三氢氟酸盐的体积比为6:3-16:4-20;所述氨解处理的时间为1~2h,所述氨解处理的温度为80~100℃;所述脱保护处理的温度为60~70℃,所述脱保护处理的时间为15~45min;所述氨解处理后还包括冷却的步骤;所述冷却包括将氨解处理后的RNA置于0~4℃放置3~6min;所述脱保护处理后还包括沉淀处理的步骤;所述沉淀处理包括向脱保护处理后的RNA中加入氯化钠溶液和乙醇,得到混合液,将所述混合液静置,随后离心并收集沉淀。

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