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摘要:本发明公开了一种基于扫描电镜建立全细胞膜蛋白指纹图谱的方法,涉及生物化学技术领域,包括以下步骤:制作细胞爬片样品;将细胞爬片样品安装到扫描电镜SEM中,并安装二次电子探测器ETD和背散射电子探头BSED;获得全细胞轮廓图,获得良好成分衬度Au纳米颗粒标定的蛋白分布图;获得全细胞膜蛋白指纹图。本发明采用上述一种基于扫描电镜建立全细胞膜蛋白指纹图谱的方法,采用扫描电子显微镜SEM,以二次电子、背散射电子成像,以几个纳米的分辨率,获得由金纳米颗粒特异性标定的单细胞单分子水平成像,利用蒙太奇拼接图方法获得膜蛋白的全细胞成像,实现了膜蛋白聚合状态的原位单分子观察,包括单体、二聚体、多聚体,同时建立膜蛋白全细胞指纹图谱。
主权项:1.一种基于扫描电镜建立全细胞膜蛋白指纹图谱的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤S1、进行蛋白标定,并制作细胞爬片样品;步骤S2、将细胞爬片样品安装到扫描电镜SEM中,并安装二次电子探测器ETD和背散射电子探头BSED;步骤S3、通过二次电子探测器ETD获得全细胞轮廓图,通过背散射电子探头BSED获得良好成分衬度Au纳米颗粒标定的蛋白分布图;步骤S4、利用蒙太奇方法将图像拼接,获得全细胞膜蛋白指纹图;步骤S5、利用网格法分割图像,进行定量计算。
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百度查询: 北京工业大学 一种基于扫描电镜建立全细胞膜蛋白指纹图谱的方法
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