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一种用于三阴性乳腺癌的纳米药物及其制备方法 

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申请/专利权人:郑州大学第二附属医院

摘要:本发明涉及仿生纳米药物技术领域,公开了一种用于三阴性乳腺癌的纳米药物,包括γ‑Fe2O3纳米颗粒、3,4‑二羟基肉桂酸DHCA、葡萄糖氧化酶GOx、Anti‑Lgals2蛋白和自然杀伤细胞NK细胞膜。本发明NK细胞作为高效的效应细胞,在肿瘤免疫治疗研究中具有优势和生物相容性,将小鼠脾细胞经过一系列处理后制备了NK细胞膜,这种细胞膜作为药物的载药平台,保留了NK细胞膜原有的蛋白,使其免受免疫系统的攻击,具有长的血液循环时间的优势,同时还兼具了包载率高的特点,作为铁死亡试剂,再将NK细胞膜对其进行包裹,制备了铁死亡‑免疫协同治疗药物,有效地改善了氧化铁纳米材料靶向性差、铁死亡效率低下的问题,并提高了对三阴性乳腺癌的免疫治疗效果。

主权项:1.一种用于三阴性乳腺癌的纳米药物,包括γ-Fe2O3纳米颗粒、3,4-二羟基肉桂酸DHCA、葡萄糖氧化酶GOx、Anti-Lgals2蛋白和自然杀伤细胞NK细胞膜,其中NK细胞膜作为免疫治疗、靶向载体,γ-Fe2O3纳米颗粒作为铁死亡试剂,GOx用于增强细胞内H2O2含量,Anti-Lgals2蛋白用于降低TNBC细胞免疫逃逸。所述的NK细胞膜从小鼠脾细胞悬浮液中分离。一种用于三阴性乳腺癌铁死亡-细胞膜免疫治疗的纳米药物制备方法,主要包括以下步骤:步骤1γ-Fe2O3纳米材料的制备:醋酸锰、油胺和油酸的二甲苯溶液在加热下完全溶解后,加入去离子水反应一段时间后,继续加入高氯酸铁水溶液继续反应一段时间,反应结束后,冷却到室温,加入乙醇离心得到沉淀即为γ-Fe2O3纳米材料,沉淀分散到正己烷中储存;步骤2羧基修饰的γ-Fe2O3纳米材料的制备:将步骤1中γ-Fe2O3纳米材料溶液加入到3,4-二羟基肉桂酸DHCA的四氢呋喃溶液中,加热反应,反应结束后冷却到室温,加入NaOH溶液离心得到沉淀为羧基修饰的γ-Fe2O3纳米材料;步骤3NK细胞膜的制备:取小鼠脾细胞悬浮液,离心得到NK细胞,再对NK细胞进行活化和鉴定,最后分离NK细胞膜;步骤4向步骤2中羧基修饰的γ-Fe2O3纳米材料的水溶液中加入GOx共孵育,离心除去多余GOx,得到沉淀IO@GOx溶于PBS缓冲溶液中,加入Anti-Lgals2,超声后得到GOx和Anti-Lgals2共同修饰的γ-Fe2O3纳米材料,将其与步骤3中NK下薄膜在聚酯碳酸酯多孔膜挤压机中挤压,即得到细胞膜包裹的纳米药物,并命名为IO@GA@NK。

全文数据:

权利要求:

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